Определение естественных антител у беременных

Методика определения нормальных (естественных) антител:

Анализ на определение антител, назначают всем беременным женщинам, имеющим первую группу крови (О – по системе AB0).Методика определения антител у беременных:

Для удобства сортируем кровь в три ряда, согласно группам крови отца: А, В, АВ. Там, где группа крови отца неизвестна или неуказано относим к четвёртой группе (АВ).

Напротив каждой пробирки с кровью беременной подставляем сухую чистую стеклянную пробирку (центрифужную). В неё наливаем 1 мл сыворотки и 3 мл физ.раствора.

Берём пластины на 72 лунки для серологических реакций. Подписываем их. Пластина А (где будем ставить реакции с кровью беременных женщин, чьи мужья имеют вторую А группу крови). И подписываем по правому краю А1, А2, А3 и так далее. Пластина В – когда у мужей третья В группа крови (В1, В2, В3 и так далее). Для четвёртых АВ групп крови и неизвестных планшет можно подписать так АВ А (затем 1,2,3…) и АВВ (1,2,3….).

Во все лунки подписанных пластин, кроме первых, наливаем по 100 мл физ.раствора. Чтобы было удобней и быстрей разлить физ.раствор, берём восьмиканальный дозатор на 100 мкл, и насаживаем на него наконечники через один, вот так:

Затем из стеклянных пробирок в первую (пустую) и вторую лунки пластины наливаем по 100 мкл  разбавленной сывортотки беременных. В планшет А – сыворотку беременной, у мужа которой А-группа крови. В планшет В – сыворотку мужа с В-группой.

Из вторых лунок набираем по 100 мкл и титруем до конца планшета по 100 мкл. Титр получаем следующий: 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64, 1:128, 1:256 и так далее.

Отмываем стандартные эритроциты (ка это сделать читайте ЗДЕСЬ). Добавляем с помощью пастеровской пипетки по 1 капле отмытых эритроцитов (А-эритроциты в А-лунки и  так далее). Пластинки перемешиваем осторожным постукиванием. Оставляем при комнатной температуре на 1 час.

Спустя 1 час под лампой смотрим на реакцию преципитации. Указываем титр.